第134章 黎明前的测序(第3/5页)
，你们负责给所有的移液枪换上带滤芯的枪头，准备好离心管和冰盒。”
“师兄，亦舟，你们俩配合我，准备过柱子提取。”
江河站在超净工作台前，将转运箱打开，取出装有灭活样本的冻存管。
“开始。”
实验室内。
严肃，高效。
这群年纪轻轻的学生，此刻展现出了惊人的纪律性。
这就是培训的成果！
江河拿起一把p1000的移液枪，套上带滤芯的枪头。
“加入trizol试剂，1毫升。”
将样本移入新的离心管中，注入trizol。
透明的液体瞬间混合。
“室温静置5分钟，让核蛋白复合体彻底解离。”
江河看了一眼墙上的挂钟。
五分钟一到。
“加氯仿，0.2毫升。”
“盖紧管盖，剧烈振荡15秒。”
“静置3分钟。”
顾亦舟在一旁已经打开了高速冷冻离心机的盖子，温度已经预冷到了4c。
“放入离心机，配平，12000转，15分钟。”
这15分钟极其漫长。
“滴——”
离心机停止。
江河小心翼翼取出离心管。
在冷光的照射下，管内的液体清晰地分成了三层：
底层是红色的酚氯仿相，中间是一层薄薄的白色蛋白交界面，最上层是无色的水相。
所有的病毒rna，都溶解在这最上层的无色水相中。
江河深吸了一口气，换了一把p200的移液枪。
这一步是整个提取过程中最关键的一步。
如果吸到了中间的蛋白层或者底层的有机相，整个样本就废了。
他将手肘支撑在台面上，按下移液枪的按钮。
枪尖精准悬停在无色水相的中央，缓缓吸取了400微升的液体，移入一个全新的无酶离心管中。
全程，江河的手没有一丝颤抖。
外科医生的定力，在这一刻展现得淋漓尽致。
陆晓林在旁边看得头皮发麻。
——哪怕是浸淫实验室多年的老研究员，悬空吸取水相时也难免会有细微的晃动，但江河的手就像是被焊死了一样，稳得可怕。
“加入等体积的异丙醇，陈浩，递冰盒。”
样本在冰上静置了10分钟后，再次放入冷冻离心机。
12000转，10分钟。
再次取出时，管底出现了一点点半透明胶状沉淀。
“rna沉淀出来了。”程溪瑶隔着护目镜，眼睛亮了起来。
江河：“弃上清，加1毫升75%的冰乙醇洗涤沉淀。”
轻轻悬浮沉淀后，第三次离心。
7500转，5分钟。
最后，用移液枪极其小心地吸走所有的乙醇液体，将离心管敞口放置在超净台的通风处。
“风干5分钟，不能干透，否则很难溶解。”
五分钟后，江河加入20微升rnase-free的水，轻轻吹打。
“去测浓度。”江河把样本递给陆晓林。
陆晓林拿着样本走到nanodrop分光光度计前，取了一微升滴在检测基座上，放下悬臂。
电脑屏幕上立刻跳出一条曲线。
“浓度120 ng/μl，a260/280比值2.02。”陆晓林声音迅速，“师弟，提取极其完美！纯度极高，没有蛋白和苯酚污染！”
陈浩几个人长长地松了一口气，互相对视了一眼。
做到了！
江河毫不犹豫，道：“立刻进行逆转录，rna极易降解，必须马上把它变成稳定的cdna。”
“引物用什么？”陆晓林问。
“用随机六聚体引物
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“师兄，亦舟，你们俩配合我，准备过柱子提取。”
江河站在超净工作台前，将转运箱打开，取出装有灭活样本的冻存管。
“开始。”
实验室内。
严肃，高效。
这群年纪轻轻的学生，此刻展现出了惊人的纪律性。
这就是培训的成果！
江河拿起一把p1000的移液枪，套上带滤芯的枪头。
“加入trizol试剂，1毫升。”
将样本移入新的离心管中，注入trizol。
透明的液体瞬间混合。
“室温静置5分钟，让核蛋白复合体彻底解离。”
江河看了一眼墙上的挂钟。
五分钟一到。
“加氯仿，0.2毫升。”
“盖紧管盖，剧烈振荡15秒。”
“静置3分钟。”
顾亦舟在一旁已经打开了高速冷冻离心机的盖子，温度已经预冷到了4c。
“放入离心机，配平，12000转，15分钟。”
这15分钟极其漫长。
“滴——”
离心机停止。
江河小心翼翼取出离心管。
在冷光的照射下，管内的液体清晰地分成了三层：
底层是红色的酚氯仿相，中间是一层薄薄的白色蛋白交界面，最上层是无色的水相。
所有的病毒rna，都溶解在这最上层的无色水相中。
江河深吸了一口气，换了一把p200的移液枪。
这一步是整个提取过程中最关键的一步。
如果吸到了中间的蛋白层或者底层的有机相，整个样本就废了。
他将手肘支撑在台面上，按下移液枪的按钮。
枪尖精准悬停在无色水相的中央，缓缓吸取了400微升的液体，移入一个全新的无酶离心管中。
全程，江河的手没有一丝颤抖。
外科医生的定力，在这一刻展现得淋漓尽致。
陆晓林在旁边看得头皮发麻。
——哪怕是浸淫实验室多年的老研究员，悬空吸取水相时也难免会有细微的晃动，但江河的手就像是被焊死了一样，稳得可怕。
“加入等体积的异丙醇，陈浩，递冰盒。”
样本在冰上静置了10分钟后，再次放入冷冻离心机。
12000转，10分钟。
再次取出时，管底出现了一点点半透明胶状沉淀。
“rna沉淀出来了。”程溪瑶隔着护目镜，眼睛亮了起来。
江河：“弃上清，加1毫升75%的冰乙醇洗涤沉淀。”
轻轻悬浮沉淀后，第三次离心。
7500转，5分钟。
最后，用移液枪极其小心地吸走所有的乙醇液体，将离心管敞口放置在超净台的通风处。
“风干5分钟，不能干透，否则很难溶解。”
五分钟后，江河加入20微升rnase-free的水，轻轻吹打。
“去测浓度。”江河把样本递给陆晓林。
陆晓林拿着样本走到nanodrop分光光度计前，取了一微升滴在检测基座上，放下悬臂。
电脑屏幕上立刻跳出一条曲线。
“浓度120 ng/μl，a260/280比值2.02。”陆晓林声音迅速，“师弟，提取极其完美！纯度极高，没有蛋白和苯酚污染！”
陈浩几个人长长地松了一口气，互相对视了一眼。
做到了！
江河毫不犹豫，道：“立刻进行逆转录，rna极易降解，必须马上把它变成稳定的cdna。”
“引物用什么？”陆晓林问。
“用随机六聚体引物
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