第203章 孙教授：打不过能加入吗？(第2/4页)
疗组长，拿副高待遇了，起码买两百斤。”
“好，没问题，学校人多，总分的完。”
医院冷冷的灯光下。
两人是满满的善意。
“说起项目组……”杨煦咳嗽一声，“咱们今天也没别的手术安排了，正好，去一趟学校？”
江河歪头：“去学校干嘛？”
“去看看你们那个mirna早筛项目做得怎么样了啊，作为你的导师，我得时刻关注你的科研进度，再说了，买橘子的事也得跟他们说一声，顺便……带几个现成的橘子给他们尝尝。”
江河心中一乐。
看项目是假，送橘子是假。
想去见王晓晴教授才是真！
“好的老师，走吧。”
……
去南医大的路上，杨煦亲自开车。
“江河啊，王教授他们在实验室，有没有什么难点？”
江河随口答道：“刚卡在rna提取这一步，血清里的游离核酸含量太低，蛋白又多，trizol法很容易带入杂质，a260/280的比值一直上不去。”
“那你们现在是怎么解决的？”杨煦开始套话。
江河笑了笑，心中了然，便详细地讲解了一下：
“双重氯仿抽提，加糖原共沉淀，第一次加氯仿离心后，吸取上清液，移入新的离心管，再加一次等体积的氯仿进行第二次离心，这样可以最大限度去除蛋白污染，浓度不够的问题，就在加异丙醇沉淀前，补5微升5mg/ml的糖原作为共沉淀剂。”
杨煦连连点头。
半小时后，两人提着一袋橘子，来到学校实验室。
听到推门声，众人抬起头。
“杨主任？”
“老大？”
“来来来，大家先停一下手里的活，休息十分钟。”杨煦热情地招呼着，“这是我跟江河特意给你们带的沙糖橘，尝尝，甜得很。”
众人闻言，纷纷围了过来。
王晓晴也拿起一个橘子剥开。
杨煦状似自然的站到王晓晴旁边。
随口说道：
“我看你们这进度，是在做rna提取的最终洗涤吧？”
王晓晴点头：“嗯，江河刚定下的方案，这批是用双重氯仿法跑的，还在等离心结果。”
“双重氯仿法，是个好思路。”
杨煦道：“血清样本和组织样本不一样，trizol试剂用在血清上，最大的痛点就是蛋白含量超标，你们在吸取水相上清液的时候，稍有不慎就会把中间的蛋白层带出来，这会导致下游逆转录直接失败。”
“所以，牺牲第一次的取液量来换取纯度是极其必要的，把第一次吸出的上清液，再加一次等体积的氯仿，剧烈震荡后进行二次离心，这样一来，蛋白杂质基本就被洗干净了。”
几个学生都纷纷点头。
杨教授不愧厉害。
说的跟江河说的一模一样。
王晓晴也有些意外地看向杨煦：
“杨主任，你对基础分子实验也这么有研究？”
杨煦故作谦虚：“医学是不分家的嘛，临床和基础本来就是相辅相成的，再说了，你们这套方案，为了补足二次抽提带来的浓度流失，肯定在沉淀前加了东西吧？”
王晓晴再度惊讶，乖巧点头：“确实。”
“5微升，5mg/ml的糖原，糖原作为共沉淀剂，不影响下游的pcr扩增，还能让微量的rna在管底形成肉眼可见的沉淀团块，我说的对吧？”
“对的对的。”
王晓晴觉得杨煦有点厉害了，稍有些崇拜。
杨煦心里乐开了花，脸上云淡风轻。
他转过头，看了江河一眼，挑了挑眉毛。
江河默默地剥开一个橘子，把目光偏向窗外，看天。
——想装就装吧，谁让你是我老师呢。
休息
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“好，没问题，学校人多，总分的完。”
医院冷冷的灯光下。
两人是满满的善意。
“说起项目组……”杨煦咳嗽一声，“咱们今天也没别的手术安排了，正好，去一趟学校？”
江河歪头：“去学校干嘛？”
“去看看你们那个mirna早筛项目做得怎么样了啊，作为你的导师，我得时刻关注你的科研进度，再说了，买橘子的事也得跟他们说一声，顺便……带几个现成的橘子给他们尝尝。”
江河心中一乐。
看项目是假，送橘子是假。
想去见王晓晴教授才是真！
“好的老师，走吧。”
……
去南医大的路上，杨煦亲自开车。
“江河啊，王教授他们在实验室，有没有什么难点？”
江河随口答道：“刚卡在rna提取这一步，血清里的游离核酸含量太低，蛋白又多，trizol法很容易带入杂质，a260/280的比值一直上不去。”
“那你们现在是怎么解决的？”杨煦开始套话。
江河笑了笑，心中了然，便详细地讲解了一下：
“双重氯仿抽提，加糖原共沉淀，第一次加氯仿离心后，吸取上清液，移入新的离心管，再加一次等体积的氯仿进行第二次离心，这样可以最大限度去除蛋白污染，浓度不够的问题，就在加异丙醇沉淀前，补5微升5mg/ml的糖原作为共沉淀剂。”
杨煦连连点头。
半小时后，两人提着一袋橘子，来到学校实验室。
听到推门声，众人抬起头。
“杨主任？”
“老大？”
“来来来，大家先停一下手里的活，休息十分钟。”杨煦热情地招呼着，“这是我跟江河特意给你们带的沙糖橘，尝尝，甜得很。”
众人闻言，纷纷围了过来。
王晓晴也拿起一个橘子剥开。
杨煦状似自然的站到王晓晴旁边。
随口说道：
“我看你们这进度，是在做rna提取的最终洗涤吧？”
王晓晴点头：“嗯，江河刚定下的方案，这批是用双重氯仿法跑的，还在等离心结果。”
“双重氯仿法，是个好思路。”
杨煦道：“血清样本和组织样本不一样，trizol试剂用在血清上，最大的痛点就是蛋白含量超标，你们在吸取水相上清液的时候，稍有不慎就会把中间的蛋白层带出来，这会导致下游逆转录直接失败。”
“所以，牺牲第一次的取液量来换取纯度是极其必要的，把第一次吸出的上清液，再加一次等体积的氯仿，剧烈震荡后进行二次离心，这样一来，蛋白杂质基本就被洗干净了。”
几个学生都纷纷点头。
杨教授不愧厉害。
说的跟江河说的一模一样。
王晓晴也有些意外地看向杨煦：
“杨主任，你对基础分子实验也这么有研究？”
杨煦故作谦虚：“医学是不分家的嘛，临床和基础本来就是相辅相成的，再说了，你们这套方案，为了补足二次抽提带来的浓度流失，肯定在沉淀前加了东西吧？”
王晓晴再度惊讶，乖巧点头：“确实。”
“5微升，5mg/ml的糖原，糖原作为共沉淀剂，不影响下游的pcr扩增，还能让微量的rna在管底形成肉眼可见的沉淀团块，我说的对吧？”
“对的对的。”
王晓晴觉得杨煦有点厉害了，稍有些崇拜。
杨煦心里乐开了花，脸上云淡风轻。
他转过头，看了江河一眼，挑了挑眉毛。
江河默默地剥开一个橘子，把目光偏向窗外，看天。
——想装就装吧，谁让你是我老师呢。
休息
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